Zestaw do szybkiego testu bezpieczeństwa żywności przeznaczony do liofilizowanych odczynników PCR w czasie rzeczywistym do szybkiego i czułego wykrywania patogenów w żywności

LyoDt^® Odczynnik do detekcji metodą PCR w czasie rzeczywistym, liofilizowanydla Staphylococcus  aureus

Użycie’Instrukcja obsługi

1. OPIS

ujemny., Gram-dodatni ziarniak należący do rodzaju Staphylococcus, jest powszechnym patogenem przenoszonym przez żywność, zdolnym do wytwarzania enterotoksyn, które powodują zatrucia pokarmowe. Ten produkt to liofilizowany odczynnik do PCR w czasie rzeczywistymdo wykrywania ujemny.35 Wykorzystuje wysoce zachowany NUC gen ujemny. jako cel detekcji. Jest to mastermix zawierający wszystkie niezbędne składniki, z wyjątkiem matrycowego DNA, i jest wstępnie dozowany jako pojedynczy test w probówkach PCR w celu ułatwienia użytkowania. Ten produkt nie wymaga łańcucha chłodniczego do transportu i przechowywania, co znacznie obniża koszty wysyłki i eliminuje ewentualne straty spowodowane marnotrawstwem odczynnika i zanieczyszczeniem aerozolami.

2. SPECYFIKACJE I SKŁAD

3. PRZECHOWYWANIE I TRWAŁOŚĆ

Przechowywać w temperaturze otoczenia (5-3010sek)35 Jest stabilny do 12 miesięcy35 Po otwarciu opakowania próżniowego, należy przechowywać niewykorzystane produkty w dołączonej, zamykanej plastikowej torbie z osuszaczami, i w torebce z folii aluminiowej. 

UWAGA: 

Zmniejszanie się granulatu odczynnika jest oznaką wnikania wilgoci do probówki i zawilgocenia odczynnika. Wszelkie odczynniki o znacznie mniejszym rozmiarze granulatu niż zwykle należy wyrzucić lub przetestować z kontrolą pozytywną przed użyciem do testowania próbek.   

4. WYMAGANE DODATKOWE SPRZĘTY I ODCZYNNIKI

1) Aparat do PCR w czasie rzeczywistym

2) Pipety i końcówki

Wynik Woda wolna od-nukleaz

4) Zestaw do ekstrakcji kwasów nukleinowych

5. KOMPATYBILNE SYSTEMY PCR W CZASIE RZECZYWISTYM

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 960035

6. AKCEPTOWANE PRÓBKI

Bulion wzbogacający żywność, wymiociny, próbki biegunkowe itp.

7. PROCEDURA POSTĘPOWANIA

1) Kwas naliza ukleinowy Ekstrakt

Wyekstrahować DNA z próbek za pomocą odpowiedniego zestawu ekstrakcyjnego. Zaleca się, aby DNA było elucjowane w około 100μl buforu elucji (TE lub wodzie wolnej od nukleaz H₂O) w ostatnim etapie ekstrakcji. Oczyszczony kwas nukleinowy należy użyć natychmiast lub przechowywać w temperaturze -20°C.

2) Przygotowanie kontroli pozytywnej

Kontrolę pozytywną można przechowywać w temperaturze otoczenia przed rehydratacją do 12 miesięcy. Powinna być rehydratowana przed użyciem poprzez dodanie 250 μl buforu TE lub nukleazy-wolnej H₂O, wirować z małą prędkością przez 15-20 sekund i odwirować z małą prędkością przez 15-20 sekund. Użyć natychmiast lub przechowywać w temperaturze -2010sek35

2) PCR w czasie rzeczywistym Mieszanka Przygotowanie

A) Otworzyć opakowanie próżniowe i wyjąć pasek 8-probówkowys zawierający odczynnik. Sprawdzić, czy granulat znajduje się na dnie probówki (Wytnij liczbę probówek w razie potrzeby jeśli to konieczne). Jeśli dostarczone probówki nie są kompatybilne z Twoim instrumentem, przenieś granulat odczynnika do probówki optycznej kompatybilnej z Twoim instrumentem.

B) Otworzyć probówki i wyrzucić nakrętkę(i) (nie nadaje się do aparatów PCR w czasie rzeczywistym) i przygotować mieszaninę reakcyjną na lodzie, jak poniżej.

* Woda wolna od nukleaz może być używana jako kontrola negatywna.

C) Zamknąć PCR za pomocą nakrętek (pasków) odpowiednich do PCR w czasie rzeczywistym(brak w zestawie).

D) Wirować probówki z małą prędkością przez 10~15 sekund i odwirować przy 3000 obr./min przez 20 sekund i umieścić je w aparacie PCR w czasie rzeczywistym.

2) Ustawienia RT-PCR

Ustawić objętość reakcji na 25μl, a procedurę amplifikacji PCR jak poniżej. Zgromadzić fluorescencję FAM w temperaturze 60°C i wybrać BRAK jako odniesienie pasywne. Krok

Wynik Analiza i Interpretacja