Liofilizowany odczynnik do detekcji PCR w czasie rzeczywistym do wysokoczułego wykrywania Listeria monocytogenes bez konieczności przechowywania w łańcuchu chłodniczym

LyoDt^®PCR w czasie rzeczywistym w postaci suszenia lodowego Reagens wykrywający Listeria monocytogenes

Użycie/s Podręcznik

1.Opis

Listeria monocytogenes,Gram-pozytywny mały kwas, jest chorobotwórcą zoonotycznym przenoszonym głównie drogą kału-ustną.Zazwyczaj zakażenie przejawia się septicemią., zapalenia opon mózgowych i monocytozy.

Produkt ten jest lodowo suszonym reagentem PCR w czasie rzeczywistymdla wykrycieListeria monocytogenes. Wykorzystuje wysoce konserwowane Własność gen zListeria monocytogenes jako cel wykrycia. Jest to mieszanka mistrzowska zawierająca wszystkie niezbędne składniki, z wyjątkiem DNA szablonu, i jest wstępnie dystrybuowana jako pojedynczy test w rurach PCR w celu łatwego użycia.Produkt ten nie wymaga łańcucha chłodnego do transportu i przechowywania, co znacząco obniża koszty wysyłki i eliminuje ewentualne straty spowodowane marnotrawstwem odczynników i zanieczyszczeniem aerozolami.

2Specyfikacje i skład

3. STROJENIE I okres trwałości

Przechowywaćw temperaturze otoczenia (5-30 dni)°C). Jest stabilny przez okres do 12 miesięcy. Po otwarciu opakowania próżniowego należy przechowywać niewykorzystane produkty w dostarczonej plastikowej torebce, która może być ponownie zamknięta, w której znajdują się środki suszące.a takżew aluminiowej torbie. 

UWAGA: 

Zmniejszanie się peletu reagentu jest oznaką wniknięcia wilgoci do rurki i zmniejszenia wilgotności reagentu.Wszelkie odczynniki o znacznie mniejszym rozmiarze pelet niż zwykle należy usunąć lub przetestować z kontrolą dodatnią przed użyciem. do badań próbek.

4. Wymagane dodatkowe wyposażenie i odczynniki

1)Instrument PCR w czasie rzeczywistym

2)Pipszczepionkai napiwki

3)Nukleasa-woda wolna

4)Zestaw do ekstrakcji kwasu nukleinowego

5Kompatybilne systemy PCR w czasie rzeczywistym

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. akceptowalne próbki

Bród do wzbogacania żywności, wymioty, próbki biegunki itp.

7Procedura operacyjna

1)WęglowodanyACIDEwyciąganie

EkstraktDNAz próbek przy użyciu odpowiedniego zestawu ekstrakcyjnego.Zaleca się, abyDNAjest eluowany około 100 μl buforu elucyjnego(TE lubH wolny od nukleaz₂O)w ostatnim etapiewydobycie.Oczyszczony kwas nukleinowy należy zużyć natychmiast lub przechowywać w temperaturze -20°C.

2)Przygotowanie do kontroli dodatniej

Pozytywną kontrolę można przechowywać w temperaturze otoczenia przed rehydratacją do 12 miesięcy.To...przed użyciem należy go nawodnićdodając250μlz buforem TE lub nniezawierające ucleaseH₂O,Wykorzystanie natychmiastowe lub przechowywaniew -20°C.

3)PCR w czasie rzeczywistymMIXPodszkodowanie

A) Otwórz opakowanie próżniowe i wyjąć 8- rurkowy paseksSprawdź, czy pelet znajduje się na dnie rurki. (Zmniejszyć liczbę rur w razie potrzeby jeśliniezbędne)Jeżeli dostarczone rurki nie są kompatybilne z przyrządem, należy przenieść peletę reagentu do rurki optycznej kompatybilnej z przyrządem.

B) Otwórz rurki i wyrzuć pokrywę (nie nadającą się do urządzeń PCR w czasie rzeczywistym) i przygotuj mieszaninę reakcyjną na lodzie, jak poniżej.

* Woda wolna od nukleaz może być stosowana jako kontrola negatywna.

C)PCR należy zatkać za pomocą zakrywek (przęci) odpowiednich do PCR w czasie rzeczywistym.(nie podano).

D) Wrzucić rurki z niską prędkością przez 10 ~ 15 sekund, i odśrodkować przy 3000 obr./min przez 20 sekund i umieścić je w przyrządzie PCR w czasie rzeczywistym.

4)Ustawienie RT-PCR

Ustawić objętość reakcji na 25μl i procedurę wzmocnienia PCR zgodnie z poniższym. fluorescencji w temperaturze 60°C i wybrać NONE jako pasywne odniesienie.

5)WynikAanalizya takżeJa...Wymowa